Recentemente o nosso grupo está estudando as enzimas de insetos que utilizam compostos lignocelulosicos como baratas e cupins. Neste sentido o presente projeto visa o isolamento dos genes selvagens e modificados pela reação de amplificação de DNA em cadeia (PCR) aleatória de celulases e hemicelulases da barata (Periplaneta americana) e do cupim Nasutitermes sp) alimentados exclusivamente com bagaço de cana (como exclusiva fonte de alimentos). Objetivos específicos- Construção de bibliotecas de cDNA de intestino de barata e cupins alimentados com bagaço de cana.- Clonagem e expressão da celulase de P.americana.- Modificação dos genes nativos das celulases de P. americana e cupins através da reação de PCR com "primers" aleatórios.- Expressão das celulases modificadas em vetores de expressão bacterianos ou leveduras. - Caracterização bioquímica das atividades celulásicas dos mutantes utilizando substratos celulósicos solúveis e insolúveis.- Caracterização bioquímica das hemicelulases de P. americana e cupins em laboratório. - "Screening" das bibliotecas utilizando sondas de genes de hemicelulases. - Clonagem e expressão heteróloga das hemicelulases de P. americana e cupins alimentados exclusivamente com bagaço de cana.
